Discovery znanje
/ Knowledge Discovery >> Discovery znanje >> znanost >> fizikalna znanost >> forenzična znanost >>

Kako DNK profiliranje Works

oličino vzorca razpoložljivih DNK.

Prvi način za ustvarjanje profila DNA je RFLP ali omejitev dolžine fragment polimorfizem. RFLP se ne uporablja tako pogosto, je danes, saj zahteva velik vzorec DNK - toliko kot 25 dlak ali niklja velika madeža telesne tekočine - in lahko traja tudi mesec dni za dokončanje [vir: Baden]. Prav tako zahteva obravnavanje več odsekov gredico DNA najti razlike, kar je zamudno in dopušča več prostora za človeške napake. Nekateri postopki za analizo RFLP se uporabljajo tudi v drugih vrstah profiliranja DNK. Za RFLP, koraki so:

  1. Ločene belo in rdeče krvne celice s centrifugo.
  2. jedra Extract DNK iz belih krvničk. To naredimo tako, kopanje celice v vroči vodi, nato pa dodal, sol, in dajanje mešanico nazaj v centrifuge [vir: Univerza v Arizoni].
  3. Cut DNA strand na koščke, ki uporabljajo restrikcijski encim.
  4. Kraj fragmenti v enem koncu blazino agaroznem gelu z elektrodami v njej. Agarozni gel je narejen iz agar-agar, tip alg, ki se spremeni v želatino, kadar je raztopljen v vreli vodi.
  5. Uporabite električni tok na segmente DNA razvrstite po dolžini. Ta proces se imenuje elektroforezo na agaroznem gelu. Elektroforeza se nanaša na postopek za premikanje negativno nabite molekule preko gela z elektriko. Krajši odseki premakniti dlje od njihove prvotne lokacije, medtem ko je več tisti ostati bližje. Segmenti poravnati v vzporednih vrstah.
  6. Uporabite list nitroceluloze ali najlon, da popivnamo DNK. List se obarvajo tako so vidni s prostim očesom, različne dolžine pasov DNK. Z obdelavo list s sevanjem, se ustvari autoradiograph. Ta slika na rentgenskega filma, ki ga razpadne vzorcu sevanja leve. Autoradiograph, s svojimi značilnimi temnih vzporednih pasovih, je profil DNA.

    PCR (verižna reakcija s polimerazo) analiza je ponavadi prvi korak pri ustvarjanju profila DNK danes. PCR se lahko pomnožuje majhno količino DNA ustvariti večji vzorec za analizo. To počne s pomočjo ponavljajoč se proces, ki traja približno pet minut. Prvič, toplotno stabilna DNA polimeraza - doda - poseben encim, ki se veže na DNK, in omogoča, da škodljive stranske učinke. Nato se vzorec DNK jo segreli na 200 ° F (93 ° C) za ločevanje navojev. Nato se vzorec ohladimo in ponovno segrejemo. Pogrevanje podvoji število kopij. Ko je ta postopek ponovi približno 30-krat, je dovolj DNA za nadaljnjo analizo.

    PCR je prvi korak pri analizi STRs (Short Tandem ponavlja), ki so zelo majhne, ​​specif

    Page [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7]